核轉錄因子（NF-kB）ELISA 試劑盒

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標本要求

1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

核轉錄因子（NF-kB）ELISA 試劑盒

酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay（簡寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定（ELISA）為免疫學中的經典實驗，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。

核轉錄因子（NF-kB）ELISA 試劑盒

過氧化物酶

過氧化物酶廣泛分布于植物中，辣根中含量高，從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶（HRP），是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構成的一種糖蛋白（含糖量18%），分子量約40 000，約由300個氨基酸組成，等電點為pH 3-9，催化反應的適pH值因供氫體不同而稍有差異，一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的大吸收光譜分別為275nm和403nm。

酶的純度以RZ表示：RZ=OD403/OD275

純酶的RZ多在3.0以上，高為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶，非酶蛋白約占 75%，不能用于標記。RZ在2.5以上者方可用于標記。HRP的作用底物為過氧化氫，催化反應時的供氫體有幾種：（1）鄰苯二胺（OPD），產物為橙色，可溶性，敏感性高，大吸收值在490nm，可用肉眼觀察判別，容易被濃H2SO4終止反應，顏色可在數小時內不改變,是目前國內ELISA中常用的一種；（2）聯大茴香胺（OD）,產物為橘黃色，大吸收值在400nm，顏色較穩定；（3）5－氨基水楊酸（5－AS）：產物為深棕色，大吸收值在449nm，部分溶解，敏感性較差；（4）鄰聯甲苯胺（OT）產物為藍色，大吸收值在630nm，部分溶解，不穩定，不耐酸，但反應快，顏色明顯。